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人环磷酸腺苷 C--- ELISA-纽斯特生物技术

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2022-5-1  
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elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1ppm,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度。比如水中总无机氯含量测定,样品水中含有无机氯20mg/l,取100ml被测水样品,加入0.1ml浓度为10mg/ml的含无机氯标准样品,测定时忽略体积变化,如果测定出样品中无机氯为2.98mg/l,则认为回收率为99%。




对于生长的组织培养液中的细胞,首先移除培养基,然后加入0.1m hcl处理细胞。孵育10分钟并观察细胞是否被裂解;如果裂解不充分,接着孵育10分钟并观察。以大于600g离心力于室温离心,收集上清直接用于实验。临用前在0.1m hcl中加入0.1%至1%浓度的triton-x 100可增强细胞和组织裂解。在这个浓度范围内,人环磷酸腺苷 c--- elisa,去污剂并不干扰试验的结合部位,但是会适度的增加光密度值。含有triton的样品需利用标准曲线估计浓度,为了较精l确的测定,标准曲线需以相同方式稀释。取1 ml细胞培养上清加入10μl浓---,600g离心力于室温离心,上清液直接用于实验测定分析。






包被抗l体或抗原的选择:将抗l体或抗原吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求ph在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的较适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度0.1、1.0和10μg/ml等进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的od值。选择od值较大而蛋白量较少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
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